土壤磷酸酶测定方法（p土壤磷酸酶测酸性还是碱性）-湖南省土壤肥料研究

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（1）用吸管吸掉96孔板内的培养液，用PBS冲洗3遍，加入含25mmol/L二乙醇胺，1mmol/L氯化镁和7mmol/L PNPP的反应液。

抑制微生物的增殖生长和生理过程，避免微生物对测定结果的干扰。甲苯可以导致某种土壤酶活性增强，而对另一种酶活性却有降低的作用，这有助于更好地分析和了解土壤中酶的特性。

土壤预处理加甲苯的作用是让土壤酶活性增强。甲苯能导致某种土壤酶活性增强，加入甲苯引起酶活性增加的可能原因是，有生活能力的微生物（但无增殖能力）细胞中尿素和反应产物的通透性增如了。

土壤的磷酸酶测定主要是靠测定培养后溶液中的游离的酚来确定的，因此，标准曲线要求酚的精度较高。

测定方法：过氧化氢酶用高锰酸钾滴定法；脲酶用靛酚蓝比色法；转化酶用3，5-二硝基水杨酸比色法。土壤样品保存：需用无菌袋承装、密封、低温条件。

土壤纤维素酶活性的测定方法包含以下步骤：准备醋酸缓冲液、CMC溶液、水合葡萄糖溶液等试剂，恒温培养箱，水浴锅，分光光度计，搅拌器，三角瓶等设备。

各种酶有各自最佳的酶活性温度和pH等，不能一概而论。一般而言的话，土壤酶的活性大概都保持在4℃左右，所以建议在4℃左右的环境下进行测定。

另外，土壤酶活性的测定最好使用新鲜的样本，采集后保存在零下20度的环境中，在三个月内完成测定。

土壤样品保存：需用无菌袋承装、密封、低温条件。

土壤酶活性测定最好使用鲜样，采集后零下20度保存，三个月以内完成测定。发布。

长期保存，需要-20度。最佳的保存在-80度，或者液氮中。酶有很强的温度依赖性，温度越高活性越强，温度越低活性越弱。低温酶的活性只是暂时降低或者消失，但是酶的分子结构并没有破坏，也就是没有失活。

1、测定TRACP 的方法有电泳法、比色法、ELISA 等方法。现在可以使用人骨纯化的破骨细胞TRACP - 5b 抗原制备的能识别人破骨细胞的单克隆抗体，通过免疫分析的方法测定TRACP - 5b。

2、TG测定的常规方法，国内普遍采用甘油磷酸氧化酶法，也是检验学会的推荐方法，但目前因为商品试剂大都未用二步酶法去除游离甘油，这对多数住院病人是不合适的。

3、SOD酶活测定方法（一）氮蓝四唑法方法提要在电子供体如甲硫氨酸存在下，核黄素受光激发，与电子供体反应被还原。

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