土壤霉菌分离（土壤霉菌分离方法）-湖南省土壤肥料研究

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1、放线菌分离：取土样1g，加入99ml无菌水中，震荡5min，制成10-2 土壤稀释液，再取0.5ml 10-2 土壤稀释液加入5ml无菌水中，制成10-3 土壤稀释液，以此类推··· ···。

2、分离土壤中能分解尿素的细菌应配制尿素作为唯一氮源的培养基，因此，原则上只有能够利用尿素的微生物才能够生长。

3、测定微生物细胞数量的方法很多，通常采用的有显微直接计数法和平板计数法。显微计数法适用于各种含单细胞菌体的纯培养悬浮液，如有杂菌或杂质，常不易分辨。

1、从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化。因为土壤中的微生物数量繁多，种类也多，所以要稀释，便于培养生长出零散的菌落，而达到分离的目的。

2、稀释的目的是为了达到每个微生物个体物理上的充分分离，以便在平板培养时能得到由单个微生物个体生长而来的菌落。由于在原材料中不同微生物本身的密度（个/g）不同，密度大的需要更高的稀释度才能达到分离的目的。

3、土壤微生物数量和种类繁多，这样不利于分离出所需微生物，将土壤悬浊液按照一定比例稀释后，有利于计数，这样你可以对采集的土壤微生物数量有一个大致的了解。

4、因为土壤中的微生物数量繁多，种类也多，所以要稀释，偏于培养生长出零散的菌落，而达到分离的目的。

5、再取各个稀释度同等量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可计算出样品中的含菌数。进行梯度稀释的原因就是使菌液最终在培养基上得到单个菌落。

1、土壤微生物分离和纯化的实验，它只出现一个菌落，那也就是因为土壤里面的一个偷懒的级别，所以他的微生物就会一个比较小的微生物，所以它这个分离和纯化实验就需要达到一个标准，就可以出现一个菌体。

2、**采集土壤样品**：选择可能有淀粉分解菌存在的土壤区域进行采样。这些区域可能包括公园、农田、森林等富含有机质的场所。 **选择培养基**：选择一个适合微生物生长的培养基，并加入淀粉作为唯一碳源。

3、**样本采集**：选择具有丰富微生物多样性的土壤样本进行采集。最好选择不同的地点，以保证样本之间的微生物多样性。 **土壤稀释**：将采集的土壤样品进行稀释，以便在后续的操作中得到足够的微生物。

4、菌落鉴定：a. 选择展示耐受性的菌落，将其分离提取纯培养物。b. 进行常规微生物学实验，例如形态学观察、革兰氏染色、生理生化测试等，以确定菌株的特性。

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