从土壤中分离酵母菌（从土壤中分离酵母菌的实验）-湖南省土壤肥料研究

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配制适合酵母菌的选择培养基，如麦芽汁培养基、YPD培养基；土壤中微生物很多，需要对土壤样品进行梯度稀释。

酵母菌的培养与分离 l、集菌：将待分离的土样和葡萄叶各称取10g，不需冲洗直接放入90ml无菌水三角瓶，振荡10min，取上清液接种于马铃薯葡萄糖培养液管中，置28-30℃，培养1-2d，可见培养液变混浊。

首先用灭菌水稀释土壤，充分摇匀，就可以用玻棒蘸取土壤溶液，在经过灭菌的特制培养基培养皿上划线，然后进行培养。一般我们培养细菌和酵母菌用LB培养基，青霉菌用PDA培养基，其他的没坐过不太清楚。

实验原理测定微生物细胞数量的方法很多，通常采用的有显微直接计数法和平板计数法。显微计数法适用于各种含单细胞菌体的纯培养悬浮液，如有杂菌或杂质，常不易分辨。

1、基本要领菌种分离主要在培养皿上进行，常用的方法是稀释法和划线法。

2、分离培养要在无菌环境中操作，培养还要在适宜的条件下，不同的微生物培养条件不一样。

3、细菌的纯种分离和接种技术中，需要注意的事项有：稀释度的问题纯种分离的时候，无非是把菌液稀释一定梯度后，涂布在诸如LB培养基上。如果没有稀释好，就会导致细菌长得太密，或者是细菌根本不长。

土壤分离纯化真菌失败的原因是在自然条件下，微生物常常在各种生态系统中群居杂聚。为了研究某种微生物的特性，或者大量培养和利用某一种微生物，必须事先从有关的生态环境中分离出所需的菌株，获得纯培养。

观察结果：对土壤稀释液平板进行计数，单菌落划线平板分离单菌落，其他平板观。察微生物种类、数量。所有平板都要照相。

酵母菌技术实验中周围培养液未吸干不会使结果偏大。应该是偏小，因为酵母菌沉在下部，上层就会少。若调查的是遗传病的发病率，则应在群体中抽样调查，若以患者家系为调查对象会导致所得到数值与实际数值偏大。

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