土壤微生物数量测定（土壤微生物含量检测方法）-湖南省土壤肥料研究

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检测成本低。相比其他微生物检测方法，稀释涂布平板法的成本较低，一般使用琼脂平板即可计算微生物数量。

测定微生物数量的常用方法有血细胞计数法，稀释涂布平板法，滤膜法，比浊法，显微镜直接计数法。

将土壤置于100ml无菌水中，充分振荡，然后离心，取上清液，得到土壤浸出液。第将土壤浸出液梯度稀释，取一定稀释度的溶液，涂平板，培养后，数菌落数。第将菌落数乘上稀释倍数，即可得到1g土壤中该微生物的数量。

在高氏培养基中培养放线菌培养2-3天能够长出菌落。取9套无菌平皿，在皿底贴上标签，注明土壤稀释液的稀释度（10-10-10-5）、组别、姓名、操作日期等。每个稀释度做三个培养皿。

实验方法细菌分离：取土样1g，加入99ml无菌水中，震荡10min，制成10-2 土壤稀释液，再取0.5ml 10-2 土壤稀释液加入5ml无菌水中，制成10-3 土壤稀释液，以此类推··· ···。

土壤样品采集采集一般定点于耕作层0--20cm，先除去表土1-- 2cm，以无菌铲采土充分混匀后用无菌塑料袋分装。

通常测定细菌菌剂含菌数时，采用10-10-10-9稀释度，测定土壤细菌数量时，采用10-10-10-6稀释度，测定放线菌数量时，采用l0-10-10-5稀释度，测定真菌数量时，采用10-10-10-4稀释度。

取一定重量的土壤，称取1g，置于100ml无菌水中，充分振荡，然后离心，取上清液，就得到土壤浸出液（可以看做土壤中的微生物全部转移至水中）。

在测定土壤中细菌、放线菌及霉菌数量的试验中，霉菌土豆培养基倒平板前加入80%乳酸数滴的原因是为了抑制其他微生物的生长，从而确保霉菌的培养和计数。

1、第取一定重量的土壤，称取1g。第将土壤置于100ml无菌水中，充分振荡，然后离心，取上清液，得到土壤浸出液。第将土壤浸出液梯度稀释，取一定稀释度的溶液，涂平板，培养后，数菌落数。

2、直接计数法中常用的是显微镜直接计数法，这种方法是先将待测样品制成悬液，然后取一定量的悬液放在显微镜下进行计数(图1- 3-1)。根据在显微镜下观察到的微生物数目来计算出单位体积内的微生物总数。

3、直接计数法和稀释平板计数法是测定微生物数量的常用方法.测量土壤中微生物，一般采用平板计数法，因为直接计数法只能依靠肉眼在显微镜下观察，误差较大。采集特定地区的土壤作为待测样品。

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